Mô tả

Bộ xét nghiệm Thyroxine (T4) – Phương pháp miễn dịch hóa phát quang – CLIA

Quy cách đóng gói

• 50 test/hộp       Dung dịch hiệu chuẩn: 0,5 mL × 2
• 2 × 50 test/hộp Dung dịch hiệu chuẩn: 0,5 mL × 2
• 4 × 50 test/hộp Dung dịch hiệu chuẩn: 1,0 mL × 2
• 50 test/hộp       Dung dịch hiệu chuẩn: 0,5 mL × 6
• 2 × 50 test/hộp Dung dịch hiệu chuẩn: 0,5 mL × 6
• 4 × 50 test/hộp Dung dịch hiệu chuẩn: 1,0 mL × 6

Mục đích sử dụng

Bộ xét nghiệm này được sử dụng để định lượng in vitro thyroxine (T4) toàn phần trong huyết thanh hoặc huyết tương người.

Thyroxine (T4) là hormon tuyến giáp chính được tổng hợp và bài tiết bởi các tế bào biểu mô nang tuyến giáp, tuy nhiên hoạt tính sinh học của T4 thấp hơn T3 khoảng 4–5 lần. T4 thường đóng vai trò là tiền hormon của T3. Phần lớn T4 trong máu tồn tại ở dạng liên kết với các protein vận chuyển, chỉ khoảng 0,03% ở dạng tự do có hoạt tính sinh học.

T4 chủ yếu tham gia quá trình khử iod tạo T3, từ đó tác động lên các thụ thể T3 và các protein liên quan trong tế bào. Các chức năng sinh lý chính của T3 bao gồm: sinh nhiệt nội sinh, thúc đẩy tăng trưởng và phát triển cơ quan, điều hòa tổng hợp và chuyển hóa protein, lipid và carbohydrate, cũng như điều hòa chuyển hóa nitrat nội sinh và thuốc. Do đó, việc đo nồng độ T4 toàn phần trong máu có ý nghĩa trong đánh giá tình trạng tổng hợp và bài tiết hormon tuyến giáp, hỗ trợ chẩn đoán các rối loạn chức năng tuyến giáp.

Hiện nay, các phương pháp phát hiện T4 chủ yếu bao gồm: xét nghiệm miễn dịch liên kết enzym (ELISA), miễn dịch hóa phát quang (CLIA), miễn dịch huỳnh quang hoặc huỳnh quang thời gian (FIA/TRFIA).

Nguyên lý xét nghiệm

Sản phẩm sử dụng vi hạt từ tính kết hợp với công nghệ miễn dịch hóa phát quang, thực hiện xét nghiệm theo nguyên lý miễn dịch cạnh tranh.

Mẫu thử, chất tách và hạt từ streptavidin được phủ kháng thể đơn dòng đặc hiệu kháng T4 của dê đã được biotin hóa được cho vào ống phản ứng để ủ. Chất tách sẽ giải phóng T4 khỏi protein liên kết trong mẫu, sau đó T4 trong mẫu gắn với kháng thể kháng T4 trên hạt từ.

Tiếp theo, dẫn xuất T4 gắn enzym phosphatase kiềm (ALP) được thêm vào, cạnh tranh gắn vào các vị trí kháng thể còn trống trên hạt từ. Sau bước rửa nhằm loại bỏ các chất không gắn, cơ chất phát quang AMPPD được bổ sung. Tín hiệu phát quang thu được tỷ lệ nghịch với nồng độ T4 trong mẫu. Nồng độ T4 được xác định dựa trên đường chuẩn giữa giá trị phát quang tương đối (RLU) và nồng độ T4.

Thành phần chính

Thuốc thử 1 (R1): Hạt miễn dịch từ

• Kháng thể đơn dòng đặc hiệu kháng T4 người (nguồn cừu): 1,0 µg/mL
• Hạt từ tính: 0,2 mg/mL

Thuốc thử 2 (R2): Hợp chất

• Dẫn xuất T4 gắn phosphatase kiềm (ALP): 0,1 µg/mL

Thuốc thử 3 (R3): Dung dịch đệm phản ứng

• Chất tách (8-acetylglucosamine-1-phosphate, ANS): 1,0 mg/mL

Chất hiệu chuẩn T4

• Ngày sản xuất và hạn sử dụng được ghi trên nhãn
• Hệ thống đo lường truy xuất nguồn gốc đến IRMM-468

Lưu ý:
Không được trộn lẫn hoặc hoán đổi các thành phần giữa các lô Bộ xét nghiệm khác nhau.

Các sản phẩm cần sử dụng kèm theo

• Vật liệu kiểm soát chất lượng miễn dịch (GCN đăng ký: Guoxie Zhujin 20142406217)
• Dung dịch rửa (GCN đăng ký: Chuanrong Xiebei 20160047; Guoxiebei 20190141; Guoxiebei 20190142; Susu Xiebei 20180235)
• Dung dịch cơ chất cho hệ thống miễn dịch tự động (GCN đăng ký: Chuanrong Xiebei 20160048; Guoxiebei 20140158)

Điều kiện bảo quản và hạn sử dụng

• Bộ xét nghiệm chưa mở: ổn định 12 tháng khi bảo quản kín ở 2–8°C, tránh ánh sáng.
• Sau khi mở: ổn định 28 ngày khi bảo quản ở 2–8°C, tránh ánh sáng.

Thiết bị áp dụng

• Hệ thống miễn dịch hóa phát quang tự động Orienter Biotech: LA2000, LA3000, LA3000S
• Hệ thống miễn dịch hóa phát quang tự động khác: Access 2 (81600N), UniCel DxI 800

Yêu cầu mẫu

1. Mẫu là huyết thanh hoặc huyết tương người (chống đông heparin hoặc EDTA), thu thập theo quy trình chuẩn.
2. Mẫu phải được vận chuyển và bảo quản lạnh; ly tâm ngay sau khi lấy máu và xét nghiệm trong ngày. Nếu chưa xét nghiệm ngay, mẫu có thể bảo quản ở 2–8°C trong 6 ngày hoặc –20°C trong 6 tháng. Tránh đông – rã đông nhiều lần. Trước khi xét nghiệm, mẫu phải được cân bằng về nhiệt độ phòng.

Phương pháp xét nghiệm

1. Chuẩn bị

Bộ xét nghiệm ở dạng lỏng, sẵn sàng sử dụng, không cần pha chế.

2. Chuẩn bị thí nghiệm

• Tuân thủ hướng dẫn sử dụng này và hướng dẫn vận hành thiết bị.
• Khi sử dụng hộp thuốc thử mới lần đầu, tránh mở đóng nhiều lần để hạn chế trộn lẫn hạt từ.
• Chất hiệu chuẩn và vật liệu QC phải đạt nhiệt độ cân bằng trước khi sử dụng.
• Đặt chai thuốc thử vào khoang thuốc thử của thiết bị; quét hoặc nhập mã vạch.
• Đặt chất hiệu chuẩn vào khoang mẫu; quét mã vạch hoặc nhập thủ công để thực hiện chương trình hiệu chuẩn.
• Đặt mẫu hoặc QC vào khoang mẫu, cài đặt thông tin và bắt đầu chương trình đo.

3. Quy trình hiệu chuẩn và đo mẫu

Trộn và ủ 10 phút, sau đó thêm:

Trộn, ủ 10 phút, rửa, thêm dung dịch nền và đo tín hiệu phát quang.

• Chu kỳ hiệu chuẩn: 14 ngày
• Cần hiệu chuẩn khi sử dụng lô thuốc thử mới hoặc khi kết quả QC vượt ngoài giới hạn cho phép.

Kiểm soát chất lượng

Mỗi phòng xét nghiệm cần xây dựng hệ thống QC nội bộ theo GB/T 20468-2006 – Hướng dẫn kiểm soát chất lượng nội bộ đối với phép đo định lượng trong phòng xét nghiệm lâm sàng. Giá trị QC phải nằm trong phạm vi cho phép; nếu vượt giới hạn, cần áp dụng biện pháp hiệu chỉnh thích hợp hoặc liên hệ nhà sản xuất.

Tính toán kết quả

Thiết bị tự động tính nồng độ T4 dựa trên đường chuẩn và giá trị RLU.

• Đơn vị: ng/mL hoặc nmol/L
• Quy đổi:
  • ng/mL × 1,287 = nmol/L
  • nmol/L × 0,78 = ng/mL

Khoảng tham chiếu

• Người khỏe mạnh: 47,50 – 128,00 ng/mL

Khoảng tham chiếu được thiết lập theo CLSI C28-A3 dựa trên kết quả ≥120 mẫu lâm sàng và tài liệu tham khảo. Do khác biệt về địa lý, chủng tộc, giới tính và độ tuổi, mỗi phòng xét nghiệm nên thiết lập hoặc xác minh khoảng tham chiếu riêng.

Diễn giải kết quả

1. Kết quả xét nghiệm chỉ mang tính hỗ trợ, cần được đánh giá kết hợp với triệu chứng lâm sàng và các xét nghiệm khác.
2. Nếu nồng độ thấp hơn giới hạn phát hiện: báo cáo “<5,00 ng/mL”; nếu vượt dải đo: báo cáo “>250,00 ng/mL”.