Mô tả

Bộ xét nghiệm Peptid lợi niệu тип B (BNP) – Phương pháp miễn dịch hoá phát quang

[Quy cách đóng gói]

  50 test/hộp – Chất hiệu chuẩn: 0,5 mL × 2

  2 × 50 test/hộp – Chất hiệu chuẩn: 0,5 mL × 2

  4 × 50 test/hộp – Chất hiệu chuẩn: 1,0 mL × 2

  50 test/hộp – Chất hiệu chuẩn: 0,5 mL × 6

  2 × 50 test/hộp – Chất hiệu chuẩn: 0,5 mL × 6

  4 × 50 test/hộp – Chất hiệu chuẩn: 1,0 mL × 6

【Mục đích sử dụng】

Bộ xét nghiệm này được sử dụng để xác định in vitro nồng độ Peptid lợi niệu тип B (BNP) trong mẫu huyết tương người.

Peptid lợi niệu тип B (BNP) được tiết ra từ các tế bào cơ tim. Tiền chất gồm 108 acid amin (ProBNP) có thể bị phân cắt thành đoạn C-terminal gồm 32 acid amin có hoạt tính sinh học (BNP) và đoạn N-terminal gồm 76 acid amin (NT-proBNP) trong quá trình bài tiết hoặc sau khi đi vào máu. Sự kéo giãn tế bào cơ tim và tình trạng quá tải áp lực xuyên thành mạch cùng tham gia vào quá trình tổng hợp và phóng thích BNP.

BNP là peptid lợi niệu quan trọng nhất của thất tim, có thời gian bán huỷ sinh học khoảng 20 phút. Con đường chuyển hoá của BNP trong máu không bị ảnh hưởng bởi chức năng thận. Do đó, so với các peptid lợi niệu khác và các tiền chất của chúng, BNP là chỉ dấu nhạy và đặc hiệu hơn trong đánh giá tình trạng quá tải thất và có thể được sử dụng để hỗ trợ chẩn đoán suy tim (CHF).

Hiện nay, các phương pháp phát hiện BNP chủ yếu bao gồm:

• Phương pháp miễn dịch hấp phụ liên kết enzym (ELISA);
• Phương pháp miễn dịch hoá phát quang (CLIA);
• Phương pháp vàng keo (GICT);
• Phương pháp miễn dịch huỳnh quang hoặc huỳnh quang phân giải thời gian (FIA/TRFIA).

【Nguyên lý xét nghiệm】

Sản phẩm sử dụng hạt từ và công nghệ hoá phát quang để thực hiện xét nghiệm miễn dịch theo phương pháp sandwich. Mẫu thử, dung dịch phản ứng, hạt từ streptavidin được phủ kháng thể đơn dòng đặc hiệu kháng BNP người gắn biotin và kháng thể đơn dòng kháng BNP người gắn enzym phosphatase kiềm (ALP) được thêm vào ống phản ứng để ủ.

BNP trong mẫu liên kết với kháng thể đặc hiệu trên hạt từ tạo thành phức hợp miễn dịch. Đồng thời, kháng thể gắn enzym ALP liên kết với các vị trí kháng nguyên khác nhau của BNP trong mẫu, tạo thành phức hợp “hạt từ – BNP – liên hợp enzym”. Sau khi rửa để loại bỏ các chất không liên kết, dung dịch nền phát quang (AMPPD) được thêm vào. Enzym xúc tác phản ứng phát sáng, số photon phát ra tỷ lệ thuận với nồng độ BNP trong mẫu. Nồng độ BNP trong mẫu được tính toán thông qua đường chuẩn giữa nồng độ và giá trị phát quang tương đối (RLU).

【Thành phần chính】

Thuốc thử 1 (R1): Hạt từ miễn dịch

• Kháng thể đơn dòng cừu kháng BNP người: 1 µg/mL
• Hạt từ: 0,2 mg/mL

Thuốc thử 2 (R2): Liên hợp enzym

• Kháng thể đơn dòng dê kháng BNP người gắn phosphatase kiềm (ALP): 0,5 µg/mL

Thuốc thử 3 (R3): Dung dịch phản ứng

• Albumin huyết thanh bò (BSA): 10 mg/mL

Chất hiệu chuẩn BNP

• Peptid lợi niệu тип B (BNP)
• Ngày sản xuất và hạn sử dụng được ghi trên nhãn

Hệ thống đo lường có thể truy xuất nguồn gốc đến hệ thống đo BNP đã được cơ quan quản lý dược phẩm phê duyệt và đưa ra thị trường.

Các thành phần của các lô thuốc thử khác nhau không được hoán đổi hoặc trộn lẫn.

Các sản phẩm phải sử dụng đồng bộ:

• Vật liệu kiểm soát chất lượng miễn dịch (Số đăng ký: Guoxie Zhujin 20142406217);
• Dung dịch rửa (Số đăng ký: Chuanrong Xiebei 20160047);
• Dung dịch rửa (Số đăng ký: Guoxiebei 20190141);
• Dung dịch rửa (Số đăng ký: Guoxiebei 20190142);
• Dung dịch rửa (Số đăng ký: Susu Xiebei 20180235);
• Dung dịch nền cho hệ thống miễn dịch tự động (Số đăng ký: Chuanrong Xiebei 20160048);
• Dung dịch nền cho hệ thống miễn dịch tự động (Số đăng ký: Guoxiebei 20140158).

【Điều kiện bảo quản và hạn sử dụng】

• Bộ xét nghiệm chưa mở có hạn sử dụng 12 tháng khi bảo quản kín ở 2–8°C, tránh ánh sáng.
• Sau khi mở, bảo quản ở 2–8°C, tránh ánh sáng và sử dụng trong vòng 28 ngày.

【Thiết bị áp dụng】

• Máy phân tích miễn dịch hoá phát quang tự động của Orienter Biotech (LA2000, LA3000, LA3000S);
• Máy phân tích miễn dịch tự động (81600N – Access 2);
• Máy phân tích miễn dịch hoá phát quang tự động (UniCel DxI 800).

【Yêu cầu mẫu】

1. Mẫu là huyết tương người chống đông EDTA được thu thập theo quy trình chuẩn. Các loại mẫu khác chưa được đánh giá.
2. Mẫu cần được vận chuyển và bảo quản ở nhiệt độ thấp. Sau khi lấy máu phải ly tâm ngay và xét nghiệm trong ngày. Nếu không thể xét nghiệm ngay, có thể bảo quản ở 2–8°C trong 24 giờ hoặc ở −20°C trong 14 ngày, tránh đông – rã đông nhiều lần. Trước khi xét nghiệm, mẫu cần được cân bằng về nhiệt độ phòng. Mẫu tan huyết nhẹ, mẫu đục mỡ và mẫu vàng da nhẹ không ảnh hưởng đến kết quả xét nghiệm.

【Phương pháp xét nghiệm】

1. Chuẩn bị thuốc thử

Bộ xét nghiệm là dạng dung dịch sẵn dùng, có thể sử dụng trực tiếp.

2. Chuẩn bị thí nghiệm

Tuân thủ hướng dẫn sử dụng của Bộ xét nghiệm và tài liệu vận hành của máy phân tích miễn dịch hoá phát quang.

2.1. Trước khi sử dụng Bộ xét nghiệm mới lần đầu, nhẹ nhàng đảo ngược nhiều lần để đảm bảo hạt từ được phân tán đều. Không đảo ngược chai thuốc thử đã mở nắp.
2.2. Chất hiệu chuẩn và vật liệu kiểm soát chất lượng phải được cân bằng về nhiệt độ phòng trước khi xét nghiệm.
2.3. Đặt chai thuốc thử vào khoang thuốc thử của thiết bị. Thiết bị sẽ tự động quét mã vạch trên chai hoặc người vận hành có thể nhập thủ công.
2.4. Đặt chất hiệu chuẩn vào khoang mẫu của thiết bị. Quét mã vạch hoặc nhập thủ công thông tin, khởi động chương trình hiệu chuẩn, thiết bị sẽ tự động hoàn tất quá trình hiệu chuẩn.
2.5. Đặt mẫu thử hoặc mẫu kiểm soát chất lượng vào khoang mẫu. Sau khi thiết lập thông tin theo hướng dẫn vận hành của thiết bị, khởi động chương trình chạy và thiết bị sẽ tự động hoàn tất phép đo.

3. Quy trình hiệu chuẩn và đo mẫu

Trộn đều, ủ trong 5 phút, rửa, thêm dung dịch nền và đo giá trị phát quang.

Chu kỳ hiệu chuẩn là 28 ngày. Cần hiệu chuẩn lại trong các trường hợp sau:

• Khi sử dụng lô thuốc thử mới;
• Khi kết quả kiểm soát chất lượng nằm ngoài giới hạn cho phép.

【Quy trình kiểm soát chất lượng】

Mỗi phòng xét nghiệm cần xây dựng hệ thống và quy tắc kiểm soát chất lượng riêng theo các yêu cầu liên quan. Khuyến nghị sử dụng mẫu kiểm soát chất lượng theo tiêu chuẩn GB/T 20468-2006 – Hướng dẫn kiểm soát chất lượng nội bộ cho các phép đo định lượng trong phòng xét nghiệm lâm sàng. Giá trị đo của mẫu kiểm soát phải nằm trong phạm vi quy định trước khi tiến hành xét nghiệm mẫu bệnh phẩm. Nếu vượt ngoài phạm vi, cần thực hiện biện pháp khắc phục phù hợp hoặc liên hệ với nhà sản xuất.

【Tính toán kết quả】

Thiết bị tính toán nồng độ BNP của mẫu dựa trên đường chuẩn và giá trị RLU đo được.
Đơn vị đo nồng độ: pg/mL.

【Khoảng tham chiếu】

Người bình thường không suy tim: ≤ 100 pg/mL

Khoảng tham chiếu được thiết lập dựa trên CLSI C28-A3, kết quả của ít nhất 120 mẫu lâm sàng và các tài liệu liên quan. Do sự khác biệt về địa lý, chủng tộc, giới tính và độ tuổi, khuyến nghị mỗi phòng xét nghiệm thiết lập hoặc xác minh khoảng tham chiếu riêng.

【Giải thích kết quả】

1. Kết quả xét nghiệm chỉ là một phần trong đánh giá lâm sàng tổng thể của người bệnh. Chẩn đoán cần được xác định dựa trên triệu chứng lâm sàng và các phương pháp chẩn đoán khác.
2. Nếu nồng độ mẫu vượt quá khoảng đo, kết quả sẽ được báo cáo là >5000 pg/mL. Có thể pha loãng mẫu thủ công bằng dung dịch rửa với tỷ lệ khuyến nghị 1:9. Kết quả sau pha loãng cần nhân với hệ số pha loãng.