Mô tả

Bộ xét nghiệm định lượng kháng thể kháng Thyroglobulin (Anti-TG) – Phương pháp miễn dịch hóa phát quang (CLIA)

【QUY CÁCH ĐÓNG GÓI】

• 50 test/bộ
• 2 × 50 test/bộ
• 4 × 50 test/bộ
• 100 test/bộ
• 200 test/bộ
• 300 test/bộ
• 400 test/bộ

Chất hiệu chuẩn (Calibrators):
0,5 mL × 2; 1,0 mL × 2; 0,5 mL × 6; 1,0 mL × 6 (tùy chọn)

Chất kiểm soát chất lượng (Quality Controls):
0,5 mL × 2; 1,0 mL × 2; 2,0 mL × 2 (tùy chọn)

【MỤC ĐÍCH SỬ DỤNG】

Bộ xét nghiệm này được sử dụng để định lượng nồng độ kháng thể kháng thyroglobulin (Anti-TG) trong mẫu huyết thanh và huyết tương người.

Thyroglobulin (TG) là một glycoprotein có trong các nang tuyến giáp, với khối lượng phân tử khoảng 660.000 Dalton. TG là dạng protein chính trong tuyến giáp và là phân tử tiền chất cho quá trình tổng hợp hormone tuyến giáp. Trong điều kiện bình thường, chỉ có một lượng rất nhỏ TG tồn tại trong máu tuần hoàn.

Kháng thể kháng thyroglobulin (Anti-TG) chủ yếu xuất hiện trong viêm tuyến giáp Hashimoto, và với tỷ lệ thấp hơn trong máu của bệnh nhân Graves. Anti-TG được phát hiện ở khoảng 70% các trường hợp viêm tuyến giáp tự miễn. Việc xác định Anti-TG của bệnh nhân có thể giúp đánh giá suy giáp và bướu giáp lan tỏa do viêm tuyến giáp tự miễn, đồng thời hỗ trợ phân biệt bệnh Graves với bướu giáp dạng nốt do virus. Ngoài ra, xét nghiệm Anti-TG còn có thể được sử dụng như một xét nghiệm hỗ trợ cho xét nghiệm thyroglobulin (TG) huyết thanh.

Hiện nay, các phương pháp phát hiện Anti-TG chủ yếu bao gồm xét nghiệm miễn dịch hóa phát quang và xét nghiệm miễn dịch hấp phụ liên kết enzyme (ELISA).

【NGUYÊN LÝ XÉT NGHIỆM】

Sản phẩm sử dụng hạt từ kết hợp với công nghệ miễn dịch hóa phát quang, thực hiện phản ứng miễn dịch theo nguyên lý gián tiếp.

Trước tiên, các hạt từ streptavidin được phủ kháng nguyên TG được trộn với mẫu và ủ để hình thành phức hợp “hạt từ miễn dịch – Anti-TG”. Các chất không gắn được loại bỏ bằng bước rửa. Sau đó, kháng thể chuột kháng IgG người được đánh dấu enzyme phosphatase kiềm (ALP) được thêm vào để tạo thành phức hợp “hạt từ miễn dịch – Anti-TG – liên hợp enzyme”. Các liên hợp enzyme không gắn và các chất khác tiếp tục được loại bỏ bằng rửa.

Tiếp theo, cơ chất phát quang (AMPPD) được thêm vào; enzyme xúc tác phản ứng phát quang và phát ra photon. Các photon này được thiết bị đo lường. Số lượng photon tỷ lệ thuận với nồng độ Anti-TG trong mẫu. Nồng độ Anti-TG trong mẫu được tính toán thông qua đường chuẩn giữa nồng độ và giá trị phát quang tương đối (RLU).

【THÀNH PHẦN CHÍNH】

Thuốc thử 1 (R1): Hạt từ miễn dịch

• Kháng nguyên TG: 0,1 – 4 µg/mL
• Hạt từ: 0,1 – 0,4 mg/mL

Thuốc thử 2 (R2): Liên hợp enzyme

• Kháng thể chuột kháng IgG người gắn phosphatase kiềm (ALP): 0,01 – 1 µg/mL

Chất hiệu chuẩn Anti-TG

• Kháng thể kháng thyroglobulin
• Nồng độ: theo thông tin ghi trên nhãn

Chất kiểm soát chất lượng Anti-TG

• Kháng thể kháng thyroglobulin
• Nồng độ: theo thông tin ghi trên nhãn

Hệ thống xét nghiệm được truy xuất chuẩn tới NIBSC 65/093.

* Các thành phần của các lô thuốc thử khác nhau không được hoán đổi hoặc trộn lẫn.

Bộ xét nghiệm cần được sử dụng kèm với các sản phẩm sau:

• Chất kiểm soát chất lượng C-peptide;
• Dung dịch rửa (Wash Buffer);
• Cơ chất phát quang (Access Substrate).

【ĐIỀU KIỆN BẢO QUẢN VÀ HẠN SỬ DỤNG】

• Thuốc thử ổn định 15 tháng khi bảo quản kín, tránh ánh sáng ở 2°C – 8°C.
• Sau khi mở nắp và lắp lên thiết bị, thuốc thử ổn định 28 ngày nếu được bảo quản tránh ánh sáng.
• Chất hiệu chuẩn và chất kiểm soát chất lượng ổn định 28 ngày sau khi mở nắp khi bảo quản ở 2°C – 8°C, tránh ánh sáng.
• Ngày sản xuất và hạn sử dụng: xem trên nhãn sản phẩm.

【THIẾT BỊ ÁP DỤNG】

• Máy miễn dịch hóa phát quang tự động của Orienter: LA2000, LA3000, LA3000S
• Máy miễn dịch tự động: 81600N (Access 2)
• Máy miễn dịch hóa phát quang tự động: UniCel DxI 800

Dung dịch rửa và cơ chất sử dụng cho từng thiết bị:

【YÊU CẦU VỀ MẪU】

1. Mẫu thử là huyết thanh hoặc huyết tương người (chống đông bằng heparin), được thu thập theo các quy trình tiêu chuẩn.
2. Mẫu phải được vận chuyển và bảo quản ở nhiệt độ thấp. Mẫu cần được ly tâm ngay sau khi lấy máu và xét nghiệm trong cùng ngày. Nếu không thể xét nghiệm ngay, mẫu phải được:
   • Bảo quản ở 2°C – 8°C trong vòng 48 giờ, hoặc
   • Bảo quản ở –20°C trong vòng 1 tháng,
     để tránh việc đông – rã đông nhiều lần.
3. Mẫu cần được cân bằng về nhiệt độ phòng trước khi xét nghiệm.

【PHƯƠNG PHÁP XÉT NGHIỆM】

1. Chuẩn bị thuốc thử

Bộ xét nghiệm là thuốc thử dạng lỏng, sẵn sàng sử dụng và có thể dùng trực tiếp.

2. Chuẩn bị thí nghiệm

Vui lòng tuân thủ Hướng dẫn sử dụng này và tham khảo hướng dẫn vận hành của máy miễn dịch hóa phát quang.

2.1 Trước khi sử dụng lần đầu Bộ xét nghiệm mới, nhẹ nhàng đảo ngược chai thuốc thử vài lần để đảm bảo hạt từ được trộn đều. Không đảo ngược các chai thuốc thử đã mở nắp.
2.2 Chất hiệu chuẩn/chất kiểm soát chất lượng phải được cân bằng về nhiệt độ phòng trước khi xét nghiệm.
2.3 Đặt chai thuốc thử vào ngăn thuốc thử của thiết bị. Thiết bị sẽ tự động quét mã vạch hoặc có thể nhập mã vạch thủ công.
2.4 Đặt chất hiệu chuẩn vào ngăn mẫu của thiết bị. Bắt đầu hiệu chuẩn bằng cách quét mã vạch hoặc nhập mã vạch thủ công. Thiết bị sẽ tự động hoàn thành quá trình hiệu chuẩn.
2.5 Đặt chất kiểm soát chất lượng/mẫu cần xét nghiệm vào ngăn mẫu, thiết lập thông tin theo hướng dẫn vận hành của thiết bị và khởi động chương trình chạy. Thiết bị sẽ tự động hoàn thành xét nghiệm.

3. Quy trình hiệu chuẩn và xét nghiệm mẫu

3.1 Hiệu chuẩn

Sử dụng chất hiệu chuẩn tương thích do nhà sản xuất cung cấp. Sau khi thiết bị đo chất hiệu chuẩn và xây dựng đường chuẩn, đường chuẩn này được sử dụng để xác định nồng độ mẫu. Tham khảo hướng dẫn vận hành hệ thống tương ứng cho các cài đặt liên quan.

Trộn đều, ủ 10 phút, rửa.

| Thuốc thử R2 (µL) | 100 | 100 |

Trộn đều, ủ 10 phút, rửa, thêm cơ chất và đo giá trị phát quang.

Máy miễn dịch hóa phát quang tự động có các phương thức nhập tham số khác nhau; để biết chi tiết, vui lòng tham khảo hướng dẫn vận hành của thiết bị tương ứng hoặc liên hệ với công ty chúng tôi.

3.2 Chất kiểm soát chất lượng/mẫu thử

3.2.1 Pha loãng tự động: Tham khảo hướng dẫn vận hành của thiết bị; máy phân tích sẽ tự động pha loãng và tính toán kết quả.

3.2.2 Pha loãng thủ công: Tham khảo hướng dẫn vận hành của thiết bị và chọn “No Dilution” trên giao diện vận hành. Pha loãng mẫu theo tỷ lệ 1:49 bằng Dung dịch rửa do công ty chúng tôi cung cấp, sau đó nạp mẫu để xét nghiệm. Kết quả cuối cùng phải nhân với 50.

Chu kỳ hiệu chuẩn là 28 ngày. Cần tiến hành hiệu chuẩn khi:

• Sử dụng lô thuốc thử mới;
• Kết quả QC nằm ngoài khoảng cho phép.

4. QUY TRÌNH KIỂM SOÁT CHẤT LƯỢNG

Mỗi phòng xét nghiệm cần xây dựng hệ thống và quy tắc kiểm soát chất lượng riêng phù hợp với các yêu cầu liên quan. Khuyến cáo sử dụng chất kiểm soát chất lượng theo Hướng dẫn kiểm soát chất lượng nội bộ cho các phép đo định lượng trong phòng xét nghiệm lâm sàng (GB/T 20468-2006). Chỉ được tiến hành xét nghiệm mẫu khi các giá trị kiểm soát nằm trong giới hạn đã xác định. Nếu giá trị nằm ngoài giới hạn, cần thực hiện các biện pháp khắc phục thích hợp hoặc liên hệ với nhà sản xuất.

5. TÍNH TOÁN KẾT QUẢ

Thiết bị tính toán nồng độ dựa trên giá trị RLU đo được của mẫu và đường chuẩn.

Đơn vị nồng độ: IU/mL

【KHOẢNG THAM CHIẾU】

≤ 115,00 IU/mL

Khoảng tham chiếu này được công ty chúng tôi thiết lập dựa trên tiêu chuẩn CLSI C28-A3, kết quả xét nghiệm lâm sàng từ ≥120 mẫu và các tài liệu tham khảo khác. Do sự khác biệt có thể phát sinh do địa lý, chủng tộc, giới tính và độ tuổi, mỗi phòng xét nghiệm được khuyến cáo tự thiết lập khoảng tham chiếu riêng hoặc thực hiện xác minh chuyển giao khoảng tham chiếu này.

【DIỄN GIẢI KẾT QUẢ XÉT NGHIỆM】

1. Kết quả xét nghiệm thu được từ Bộ xét nghiệm này chỉ nên được sử dụng như một phần của đánh giá lâm sàng tổng thể. Chẩn đoán lâm sàng phải dựa trên sự kết hợp với triệu chứng và các phương pháp chẩn đoán khác.
2. Nếu nồng độ mẫu thấp hơn Giới hạn trắng (LoB), kết quả sẽ được báo cáo là < 10,00 IU/mL; nếu vượt quá khoảng đo, kết quả sẽ được báo cáo là > 4000,00 IU/mL.