BỘ XÉT NGHIỆM ĐỊNH LƯỢNG C-PEPTIDE (C-P)
Mô tả
BỘ XÉT NGHIỆM ĐỊNH LƯỢNG C-PEPTIDE (C-P)
(Phương pháp miễn dịch hóa phát quang – CLIA)
【Tên sản phẩm】
Bộ xét nghiệm định lượng C-Peptide (C-P)
(Chemiluminescent Immunoassay)
【Quy cách đóng gói】
- 50 test/hộp Chất hiệu chuẩn: 0,5 mL × 2
- 2 × 50 test/hộp Chất hiệu chuẩn: 0,5 mL × 2
- 4 × 50 test/hộp Chất hiệu chuẩn: 1,0 mL × 2
- 50 test/hộp Chất hiệu chuẩn: 0,5 mL × 6
- 2 × 50 test/hộp Chất hiệu chuẩn: 0,5 mL × 6
- 4 × 50 test/hộp Chất hiệu chuẩn: 1,0 mL × 6
【Mục đích sử dụng】
Bộ xét nghiệm này được dùng để định lượng in vitro nồng độ C-Peptide (C-P) trong mẫu huyết thanh hoặc huyết tương người.
C-Peptide (C-P) là sản phẩm phụ được tạo thành trong quá trình tiền insulin (proinsulin) bị cắt để tạo ra insulin trong quá trình sinh tổng hợp insulin. C-Peptide là một polypeptid mạch đơn gồm 31 axit amin, có khối lượng phân tử là 3021 Dalton.
Insulin và C-Peptide được bài tiết và giải phóng vào tuần hoàn máu ngoại vi với lượng tương đương nhau. Tuy nhiên, do gan hầu như không hấp thu C-Peptide nên thời gian bán hủy của C-Peptide dài hơn insulin, khoảng 35 phút; nồng độ C-Peptide trong máu ngoại vi cao gấp 5–10 lần so với insulin và biên độ dao động cũng nhỏ hơn insulin. Việc định lượng C-Peptide có thể phản ánh chức năng bài tiết insulin nội sinh và có thể được sử dụng như một xét nghiệm hỗ trợ đánh giá tình trạng bất thường trong bài tiết insulin.
Hiện nay, các phương pháp xét nghiệm C-Peptide chủ yếu bao gồm: xét nghiệm miễn dịch hấp phụ liên kết enzyme (ELISA), miễn dịch hóa phát quang (CLIA), miễn dịch huỳnh quang hoặc miễn dịch huỳnh quang phân giải thời gian (FIA/TRFIA).
【Nguyên lý xét nghiệm】
Sản phẩm này sử dụng hạt từ và công nghệ miễn dịch hóa phát quang, thực hiện xét nghiệm miễn dịch theo nguyên lý sandwich.
Trước hết, mẫu thử, dung dịch phản ứng và các hạt từ streptavidin được phủ kháng thể đơn dòng chuột kháng C-Peptide người có gắn biotin được trộn và ủ. C-Peptide trong mẫu sẽ liên kết với kháng thể đơn dòng chuột kháng C-Peptide người trên hạt từ miễn dịch để tạo thành phức hợp miễn dịch. Sau đó, các hạt từ không liên kết và các chất khác được loại bỏ bằng bước rửa.
Tiếp theo, kháng thể đơn dòng chuột kháng C-Peptide người được đánh dấu enzyme phosphatase kiềm (ALP) được thêm vào ống phản ứng và ủ. Kháng thể gắn enzyme này sẽ liên kết với các vị trí kháng nguyên khác trên C-Peptide trong mẫu để tạo thành phức hợp “hạt từ miễn dịch – C-Peptide – enzyme”. Các enzyme liên hợp không liên kết và các chất khác tiếp tục được loại bỏ bằng bước rửa.
Sau đó, thêm cơ chất phát quang (AMPPD), enzyme liên hợp xúc tác cơ chất phát quang phát ra photon. Số lượng photon phát ra tỷ lệ thuận với nồng độ C-Peptide trong mẫu. Nồng độ C-Peptide trong mẫu được tính toán thông qua đường chuẩn giữa nồng độ và giá trị phát quang tương đối (RLU).
【Thành phần chính】
Thuốc thử 1 (R1): Hạt từ miễn dịch
- Kháng thể đơn dòng chuột kháng C-Peptide người đặc hiệu: 4,0 µg/mL
- Hạt từ: 0,4 mg/mL
Thuốc thử 2 (R2): Liên hợp enzyme
- Kháng thể đơn dòng chuột kháng C-Peptide người gắn phosphatase kiềm (ALP): 0,5 µg/mL
Thuốc thử 3 (R3): Dung dịch phản ứng
- Albumin huyết thanh bò (BSA): 10 mg/mL
Chất hiệu chuẩn C-P
- C-Peptide
- Ngày sản xuất và hạn sử dụng được ghi trên nhãn.
Hệ thống xét nghiệm có khả năng truy xuất nguồn gốc theo chuẩn vật liệu tham chiếu của WHO International Reference Reagent for C-Peptide (Code 84/510).
* Các thành phần của các lô thuốc thử khác nhau không được hoán đổi hoặc trộn lẫn.
Các sản phẩm sau phải được sử dụng đồng bộ:
- Vật liệu kiểm soát chất lượng xét nghiệm miễn dịch (Số giấy chứng nhận đăng ký: Guoxie Zhujin 20142406217);
- Dung dịch rửa (Số đăng ký: Chuanrong Xiebei 20160047);
- Dung dịch rửa (Số đăng ký: Guoxiebei 20190141);
- Dung dịch rửa (Số đăng ký: Guoxiebei 20190142);
- Dung dịch rửa (Số đăng ký: Susu Xiebei 20180235);
- Dung dịch cơ chất cho hệ thống miễn dịch tự động hoàn toàn (Số đăng ký: Chuanrong Xiebei 20160048);
- Dung dịch cơ chất cho hệ thống miễn dịch tự động hoàn toàn (Số đăng ký: Guoxiebei 20140158).
【Điều kiện bảo quản và hạn sử dụng】
Bộ xét nghiệm chưa mở có hạn sử dụng 15 tháng khi được bảo quản kín ở 2–8°C, tránh ánh sáng.
Sau khi mở, thuốc thử ổn định 28 ngày khi bảo quản ở 2–8°C, tránh ánh sáng.
【Thiết bị áp dụng】
- Máy miễn dịch hóa phát quang tự động Orienter Biotech (LA2000, LA3000, LA3000S);
- Máy miễn dịch tự động hoàn toàn 81600N (Access 2);
- Máy miễn dịch hóa phát quang tự động UniCel DxI 800.
【Yêu cầu mẫu】
- Mẫu phải là huyết thanh hoặc huyết tương người (chống đông heparin hoặc EDTA) được thu thập theo quy trình chuẩn.
- Mẫu cần được vận chuyển và bảo quản ở nhiệt độ thấp. Sau khi lấy máu phải ly tâm ngay và xét nghiệm trong ngày.
- Nếu không thể xét nghiệm ngay, mẫu có thể được bảo quản ở 2–8°C trong 24 giờ hoặc ở −20°C trong 30 ngày, tránh đông – rã đông nhiều lần.
- Trước khi xét nghiệm, mẫu phải được cân bằng về nhiệt độ phòng.
【Phương pháp xét nghiệm】
1. Chuẩn bị thuốc thử
Thuốc thử dạng lỏng, sẵn sàng sử dụng, có thể dùng trực tiếp.
2. Chuẩn bị thí nghiệm
Thực hiện theo hướng dẫn sử dụng của Bộ xét nghiệm và hướng dẫn vận hành của máy miễn dịch hóa phát quang.
2.1. Trước khi sử dụng Bộ xét nghiệm mới lần đầu, nhẹ nhàng đảo ngược nhiều lần để đảm bảo hạt từ được phân tán đều. Không đảo ngược Bộ xét nghiệm đã mở.
2.2. Chất hiệu chuẩn và vật liệu kiểm soát chất lượng phải được cân bằng về nhiệt độ phòng trước khi xét nghiệm.
2.3. Đặt chai thuốc thử vào khoang thuốc thử của thiết bị. Thiết bị sẽ tự động quét mã vạch hoặc người vận hành có thể nhập mã vạch thủ công.
2.4. Đặt chất hiệu chuẩn vào khoang mẫu của thiết bị, quét mã vạch hoặc nhập thủ công thông tin mã vạch, khởi động chương trình hiệu chuẩn để thiết bị tự động hoàn thành hiệu chuẩn.
2.5. Đặt mẫu hoặc vật liệu kiểm soát chất lượng vào khoang mẫu, thiết lập thông tin theo hướng dẫn vận hành của thiết bị và khởi động chương trình đo.
3. Hiệu chuẩn và đo mẫu
Sử dụng chất hiệu chuẩn do công ty cung cấp để hiệu chuẩn. Sau khi thiết bị đo chất hiệu chuẩn và xây dựng đường chuẩn, có thể tiến hành đo mẫu.
| Thành phần | Hiệu chuẩn (C) | Mẫu (U) |
| Mẫu (µL) | – | 30 |
| Chất hiệu chuẩn (µL) | 30 | – |
| Thuốc thử R3 (µL) | 50 | 50 |
| Thuốc thử R1 (µL) | 50 | 50 |
Trộn đều và ủ 20 phút.
| Thành phần | Hiệu chuẩn (C) | Mẫu (U) |
| Thuốc thử R2 (µL) | 50 | 50 |
Trộn đều, ủ 5 phút, rửa, thêm dung dịch cơ chất và đo giá trị phát quang.
Chu kỳ hiệu chuẩn là 28 ngày. Cần hiệu chuẩn lại trong các trường hợp:
- Sử dụng lô thuốc thử mới;
- Kết quả kiểm soát chất lượng nằm ngoài phạm vi cho phép.
【Quy trình kiểm soát chất lượng】
Mỗi phòng xét nghiệm cần xây dựng hệ thống và quy tắc kiểm soát chất lượng riêng theo các yêu cầu liên quan. Khuyến nghị sử dụng vật liệu kiểm soát chất lượng theo tiêu chuẩn GB/T 20468-2006 – Hướng dẫn kiểm soát chất lượng nội bộ đối với các phép đo định lượng trong phòng xét nghiệm lâm sàng. Chỉ khi kết quả QC nằm trong giới hạn cho phép mới được tiến hành xét nghiệm mẫu.
【Tính toán kết quả】
Thiết bị tự động tính toán nồng độ C-Peptide dựa trên đường chuẩn và giá trị RLU đo được của mẫu.
Đơn vị đo: ng/mL
【Khoảng tham chiếu】
Người khỏe mạnh: 1,10 – 4,40 ng/mL
Khoảng tham chiếu được thiết lập dựa trên CLSI C28-A3, kết quả xét nghiệm của không ít hơn 120 mẫu lâm sàng và các tài liệu liên quan khác. Do sự khác biệt về địa lý, chủng tộc, giới tính và độ tuổi, mỗi phòng xét nghiệm nên tự thiết lập hoặc xác minh khoảng tham chiếu phù hợp.
【Giải thích kết quả xét nghiệm】
- Kết quả xét nghiệm chỉ được sử dụng như một phần của đánh giá lâm sàng tổng thể. Chẩn đoán cần kết hợp với triệu chứng lâm sàng và các phương pháp chẩn đoán khác.
- Nếu nồng độ mẫu vượt quá phạm vi đo, kết quả sẽ được báo cáo là >30,00 ng/mL. Mẫu có thể được pha loãng thủ công bằng dung dịch rửa với tỷ lệ khuyến nghị 1:9. Kết quả cuối cùng phải nhân với hệ số pha loãng.
Đánh giá
Chưa có đánh giá nào.