Mô tả

Bộ xét nghiệm định lượng Hormone tuyến cận giáp (PTH)
(Phương pháp miễn dịch hóa phát quang (CLIA))

Parathyroid Hormone (PTH) Assay Kit (Chemiluminescent Immunoassay)

【QUY CÁCH ĐÓNG GÓI】

【MỤC ĐÍCH SỬ DỤNG】

Bộ xét nghiệm này được sử dụng để chẩn đoán in vitro, nhằm định lượng nồng độ hormone tuyến cận giáp nguyên vẹn (PTH) trong huyết thanh hoặc huyết tương người.

Hormone tuyến cận giáp (PTH) là một hormone polypeptid được tổng hợp và tiết chủ yếu bởi các tế bào chính và tế bào ưa axit của tuyến cận giáp. Sau khi được tiết vào máu, PTH tồn tại dưới nhiều dạng không đồng nhất; trong đó chỉ phân tử PTH nguyên vẹn và đoạn đầu N-terminal là có hoạt tính sinh học.

Sự tổng hợp và bài tiết PTH chịu ảnh hưởng trực tiếp bởi nồng độ ion canxi trong huyết thanh; ngoài ra còn bị ảnh hưởng bởi các hormone khác như calcitonin, cortisol, prolactin và hormone tăng trưởng.

Các chức năng chính của PTH bao gồm:

• Tăng thải phospho qua nước tiểu và giảm nồng độ phospho máu thông qua việc làm tăng nồng độ ion canxi trong máu;
• Tăng số lượng và hoạt tính của hủy cốt bào, thúc đẩy tái cấu trúc xương;
• Tăng cường tổng hợp vitamin D và thúc đẩy hấp thu canxi tại ruột;
• Thúc đẩy quá trình chuyển đổi 25(OH)D₃ thành 1,25(OH)₂D₃ tại thận, từ đó tăng hấp thu canxi và phospho tại ruột non.

Do đó, PTH thường được sử dụng trong:

• Chẩn đoán và chẩn đoán phân biệt cường hoặc suy tuyến cận giáp;
• Chẩn đoán phân biệt tăng calci máu và hạ calci máu;
• Theo dõi chuyển hóa xương và đánh giá hiệu quả điều trị ở bệnh nhân bệnh thận mạn;
• Đánh giá nguy cơ loạn dưỡng xương ở bệnh nhân thận.

PTH là một chỉ số hỗ trợ chẩn đoán quan trọng trong đánh giá các bệnh như loãng xương và thiếu hụt vitamin D, có ý nghĩa lâm sàng quan trọng.

Hiện nay, các phương pháp phát hiện PTH chủ yếu bao gồm: miễn dịch hóa phát quang (CLIA) và ELISA.

【NGUYÊN LÝ XÉT NGHIỆM】

Sản phẩm sử dụng hạt từ tính kết hợp với kỹ thuật miễn dịch hóa phát quang (CLIA), thực hiện xét nghiệm theo nguyên lý sandwich hai bước.

Mẫu thử, dung dịch phản ứng và hạt từ streptavidin phủ kháng thể đơn dòng chuột kháng PTH người đã được gắn biotin được cho vào ống phản ứng để ủ. PTH trong mẫu sẽ gắn với kháng thể đặc hiệu trên hạt từ tạo thành phức hợp miễn dịch. Các chất không gắn kết được loại bỏ bằng bước rửa.

Sau đó, kháng thể đơn dòng chuột kháng PTH người được đánh dấu enzyme phosphatase kiềm (ALP) được thêm vào để gắn với vị trí kháng nguyên khác trên PTH, tạo thành phức hợp hạt từ – PTH – enzyme. Sau khi rửa loại bỏ enzyme dư, thêm cơ chất phát quang AMPPD.

Enzyme ALP xúc tác cơ chất phát quang phát ra photon; cường độ phát quang tỷ lệ thuận với nồng độ PTH trong mẫu. Nồng độ PTH được tính toán thông qua đường chuẩn giữa nồng độ – giá trị phát quang tương đối (RLU).

【THÀNH PHẦN CHÍNH】

Thuốc thử 1 (R1): Hạt từ miễn dịch

• Kháng thể đơn dòng chuột kháng PTH người: 2,0 µg/mL
• Hạt từ: 0,2 mg/mL

Thuốc thử 2 (R2): Chất liên hợp enzyme

• Kháng thể đơn dòng chuột kháng PTH người gắn ALP: 0,17 µg/mL

Thuốc thử 3 (R3): Dung dịch phản ứng

• Albumin huyết thanh bò (BSA): 10 mg/mL

Chất chuẩn PTH (Calibrator)

• Hormone tuyến cận giáp
• Ngày sản xuất và hạn dùng được ghi trên nhãn
• Hệ thống đo lường truy xuất tới chuẩn tham chiếu quốc tế NIBSC 95/646

⚠️ Không được trộn lẫn hoặc thay thế các thành phần giữa các lô khác nhau.

Các sản phẩm phải sử dụng đồng bộ:

• Vật liệu kiểm soát chất lượng miễn dịch (Số đăng ký: Guoxie Zhujin 20142406217);
• Dung dịch rửa (Số đăng ký: Chuanrong Xiebei 20160047);
• Dung dịch rửa (Số đăng ký: Guoxiebei 20190141);
• Dung dịch rửa (Số đăng ký: Guoxiebei 20190142);
• Dung dịch rửa (Số đăng ký: Susu Xiebei 20180235);
• Dung dịch cơ chất cho hệ thống miễn dịch tự động (Số đăng ký: Chuanrong Xiebei 20160048);
• Dung dịch cơ chất cho hệ thống miễn dịch tự động (Số đăng ký: Guoxiebei 20140158).

【ĐIỀU KIỆN BẢO QUẢN VÀ HẠN SỬ DỤNG】

• Bộ xét nghiệm chưa mở có hạn sử dụng 12 tháng khi bảo quản kín ở 2–8°C, tránh ánh sáng.
• Sau khi mở, thuốc thử ổn định trong 28 ngày khi bảo quản ở 2–8°C, tránh ánh sáng.

【THIẾT BỊ ÁP DỤNG】

• Máy miễn dịch hóa phát quang (CLIA) tự động Orienter Biotech: LA2000, LA3000, LA3000S
• Máy miễn dịch tự động: Access 2 (8160N)
• Máy miễn dịch hóa phát quang (CLIA) tự động: UniCel DxI 800

【YÊU CẦU ĐỐI VỚI MẪU】

1. Mẫu phải là huyết thanh hoặc huyết tương người (chống đông heparin), thu thập theo quy trình chuẩn.
2. Mẫu cần được bảo quản và vận chuyển ở nhiệt độ thấp. Ly tâm ngay sau khi lấy máu và xét nghiệm trong ngày.
   • Bảo quản 2–8°C: tối đa 48 giờ
   • Bảo quản -20°C: tối đa 6 tháng
   • Tránh đông – rã đông nhiều lần.
   • Mẫu phải được đưa về nhiệt độ phòng trước khi xét nghiệm.

【QUY TRÌNH XÉT NGHIỆM】

1. Chuẩn bị thuốc thử

Thuốc thử dạng lỏng, sẵn sàng sử dụng, không cần pha loãng.

2. Chuẩn bị thí nghiệm

• Lắc nhẹ thuốc thử mới trước khi sử dụng lần đầu để trộn đều hạt từ (không lắc mạnh thuốc thử đã mở).
• Chất chuẩn và mẫu QC phải được cân bằng nhiệt độ phòng.
• Đặt thuốc thử vào khoang thuốc thử của máy, quét hoặc nhập mã vạch.
• Đặt chất chuẩn vào khoang mẫu, tiến hành hiệu chuẩn theo hướng dẫn của thiết bị.
• Đặt mẫu hoặc QC vào khoang mẫu, máy sẽ tự động thực hiện xét nghiệm.

3. Hiệu chuẩn và đo mẫu

Chu kỳ hiệu chuẩn: 28 ngày, cần hiệu chuẩn khi:

• Sử dụng lô thuốc thử mới;
• Kết quả QC nằm ngoài giới hạn cho phép.

Ủ 10 phút → rửa → thêm R2 (100 µL) → ủ 10 phút → rửa → thêm cơ chất → đo phát quang.

【KIỂM SOÁT CHẤT LƯỢNG】

Phòng xét nghiệm cần thiết lập hệ thống QC nội bộ theo GB/T 20468-2006. Chỉ khi giá trị QC nằm trong giới hạn cho phép mới tiến hành xét nghiệm mẫu.

【TÍNH TOÁN KẾT QUẢ】

Máy tự động tính nồng độ dựa trên đường chuẩn.

• Đơn vị: pg/mL hoặc pmol/L
• Quy đổi:
  • pg/mL × 0,106 = pmol/L
  • pmol/L × 9,433 = pg/mL

【KHOẢNG THAM CHIẾU】

12,00 – 88,00 pg/mL

Khoảng tham chiếu được thiết lập theo CLSI C28-A3, ≥120 mẫu lâm sàng. Khuyến nghị mỗi phòng xét nghiệm xác nhận lại khoảng tham chiếu.

【DIỄN GIẢI KẾT QUẢ】

• Kết quả chỉ mang tính hỗ trợ chẩn đoán, cần kết hợp lâm sàng.
• < giới hạn phát hiện: báo <1,00 pg/mL
• khoảng đo: báo >3500,00 pg/mL