Mô tả

Bộ xét nghiệm 3,5,3´-Triiodothyronine (T3)
(Phương pháp miễn dịch hóa phát quang – Chemiluminescent Immunoassay, CLIA)

【Quy cách đóng gói】

• 50 test/hộp  Chất chuẩn: 0,5 mL × 2
• 2 × 50 test/hộp Chất chuẩn: 0,5 mL × 2
• 4 × 50 test/hộp Chất chuẩn: 1,0 mL × 2
• 50 test/hộp  Chất chuẩn: 0,5 mL × 6
• 2 × 50 test/hộp Chất chuẩn: 0,5 mL × 6
• 4 × 50 test/hộp Chất chuẩn: 1,0 mL × 6

【Mục đích sử dụng】

Bộ xét nghiệm này được sử dụng để định lượng in vitro triiodothyronine (3,5,3´-Triiodothyronine, T3) trong mẫu huyết thanh hoặc huyết tương người.

Tuyến giáp là tuyến nội tiết lớn nhất trong cơ thể người. Các nang tuyến giáp chịu trách nhiệm tổng hợp, dự trữ và giải phóng các hormon tuyến giáp khác nhau (chủ yếu là T3 và T4). Phần lớn triiodothyronine (T3) được tạo thành thông qua quá trình khử iod bằng enzym từ hormon tuyến giáp, và một phần nhỏ được tổng hợp và bài tiết trực tiếp bởi các tế bào biểu mô nang tuyến giáp. Phần lớn T3 được bài tiết vào máu sẽ gắn với các protein khác nhau, chỉ khoảng 0,3% tồn tại ở dạng tự do, và T3 tự do là dạng có hoạt tính sinh học.

Các chức năng sinh lý của T3 chủ yếu bao gồm: tăng sinh nhiệt do oxy hóa trong cơ thể, thúc đẩy sự tăng trưởng và phát triển của cơ thể, điều hòa chuyển hóa protein, lipid và carbohydrate, cũng như điều hòa chuyển hóa hormon và thuốc trong cơ thể. Do đó, việc định lượng tổng T3 trong máu là một chỉ số quan trọng phản ánh khả năng tổng hợp và bài tiết hormon của tuyến giáp, và có thể được sử dụng để hỗ trợ chẩn đoán rối loạn chức năng tuyến giáp.

Hiện nay, các phương pháp phát hiện T3 chủ yếu bao gồm:

• Phương pháp miễn dịch hấp phụ liên kết enzym (ELISA)
• Phương pháp miễn dịch hóa phát quang (CLIA)
• Phương pháp miễn dịch huỳnh quang hoặc huỳnh quang phân giải thời gian (FIA/TRFIA)

【Nguyên lý xét nghiệm】

Bộ xét nghiệm này sử dụng hạt từ miễn dịch kết hợp công nghệ hóa phát quang để thực hiện xét nghiệm miễn dịch theo nguyên lý cạnh tranh.

Đầu tiên, mẫu thử, dung dịch đệm xét nghiệm và hạt từ streptavidin được phủ kháng thể đơn dòng đặc hiệu kháng T3 của dê gắn biotin được thêm vào ống phản ứng để ủ. Dung dịch đệm xét nghiệm có tác dụng tách T3 khỏi protein gắn trong mẫu, đồng thời kháng thể đặc hiệu trên hạt từ sẽ gắn với T3 có trong mẫu.

Sau đó, dẫn xuất T3 được đánh dấu enzym phosphatase kiềm (ALP) được thêm vào ống phản ứng và gắn với các vị trí gắn kháng thể T3 còn trống trên hạt từ miễn dịch. Các liên hợp enzym không gắn và các chất khác được loại bỏ thông qua bước rửa. Tiếp theo, chất nền phát quang (AMPPD) được thêm vào; enzym xúc tác phản ứng phát quang và phát ra photon.

Cường độ phát quang thu được tỷ lệ nghịch với nồng độ T3 trong mẫu, và nồng độ T3 trong mẫu được xác định thông qua đường chuẩn giữa nồng độ và giá trị phát quang tương đối (RLU).

【Thành phần chính】

Thuốc thử 1 (R1): Hạt từ miễn dịch

• Kháng thể đơn dòng đặc hiệu kháng T3 của cừu chống người: 0,2 µg/mL
• Hạt từ tính: 0,2 mg/mL

Thuốc thử 2 (R2): Liên hợp enzym

• Dẫn xuất T3 gắn phosphatase kiềm (ALP): 0,1 µg/mL

Thuốc thử 3 (R3): Dung dịch đệm xét nghiệm

• Chất tách protein: 8-anilino-1-naphthalenesulfonic acid (ANS): 1,0 mg/mL

Chất chuẩn T3

• Triiodothyronine
• Ngày sản xuất và hạn sử dụng được ghi trên nhãn
• Hệ thống xét nghiệm có khả năng truy xuất nguồn gốc chuẩn đến IRMM-469

* Các thành phần trong các lô Bộ xét nghiệm khác nhau không được hoán đổi hoặc trộn lẫn.

Các sản phẩm phải sử dụng kèm

• Vật liệu kiểm soát chất lượng miễn dịch (Số đăng ký: Guoxie Zhujin 20142406217)
• Dung dịch rửa (Số đăng ký: Chuanrong Xiebei 20160047)
• Dung dịch rửa (Số đăng ký: Guoxiebei 20190141)
• Dung dịch rửa (Số đăng ký: Guoxiebei 20190142)
• Dung dịch rửa (Số đăng ký: Susu Xiebei 20180235)
• Dung dịch nền cho hệ thống miễn dịch tự động (Số đăng ký: Chuanrong Xiebei 20160048)
• Dung dịch nền cho hệ thống miễn dịch tự động (Số đăng ký: Guoxiebei 20140158)

【Điều kiện bảo quản và hạn sử dụng】

Bộ xét nghiệm chưa mở có hạn sử dụng 12 tháng nếu được bảo quản trong bao bì kín ở 2–8°C, tránh ánh sáng.
Sau khi mở, Bộ xét nghiệm ổn định trong 28 ngày nếu được bảo quản ở 2–8°C, tránh ánh sáng.

【Thiết bị áp dụng】

• Máy miễn dịch hóa phát quang tự động của Orienter Biotech (LA2000, LA3000, LA3000S)
• Máy miễn dịch tự động (Access 2 – 81600N)
• Máy miễn dịch hóa phát quang tự động (UniCel DxI 800)

【Yêu cầu đối với mẫu】

1. Mẫu xét nghiệm phải là huyết thanh hoặc huyết tương người (chống đông bằng heparin hoặc EDTA), được thu thập theo quy trình thao tác chuẩn.
2. Mẫu cần được vận chuyển và bảo quản ở nhiệt độ thấp. Mẫu phải được ly tâm ngay sau khi lấy máu và xét nghiệm trong cùng ngày. Nếu không thể xét nghiệm ngay, mẫu có thể được bảo quản ở 2–8°C trong 6 ngày hoặc ở −20°C trong 6 tháng; tránh việc đông – rã đông lặp lại. Trước khi xét nghiệm, mẫu phải được cân bằng về nhiệt độ phòng.

【Phương pháp xét nghiệm】

1. Chuẩn bị thuốc thử

Bộ xét nghiệm ở dạng dung dịch sẵn sàng sử dụng, có thể dùng trực tiếp.

2. Chuẩn bị thí nghiệm

Tuân thủ hướng dẫn sử dụng của Bộ xét nghiệm này và tham khảo hướng dẫn vận hành của máy miễn dịch hóa phát quang.

2.1 Trước khi sử dụng Bộ xét nghiệm mới lần đầu, lật nhẹ nhiều lần để đảm bảo hạt từ được trộn đều. Không lật Bộ xét nghiệm đã mở.
2.2 Chất chuẩn và mẫu kiểm soát chất lượng phải được cân bằng về nhiệt độ phòng trước khi xét nghiệm.
2.3 Đặt chai thuốc thử vào khoang thuốc thử của thiết bị. Thiết bị sẽ quét mã vạch trên chai thuốc thử, hoặc người vận hành có thể nhập mã vạch thủ công.
2.4 Đặt chất chuẩn vào khoang mẫu của thiết bị, quét mã vạch hoặc nhập thông tin mã vạch, khởi động chương trình hiệu chuẩn; thiết bị sẽ tự động hoàn tất quá trình hiệu chuẩn.
2.5 Đặt mẫu kiểm soát chất lượng hoặc mẫu cần xét nghiệm vào khoang mẫu của thiết bị. Sau khi cài đặt thông tin theo hướng dẫn vận hành của thiết bị, khởi động chương trình chạy; thiết bị sẽ tự động hoàn tất phép đo.

3. Quy trình hiệu chuẩn và đo mẫu

Trộn đều và ủ 10 phút.
Sau đó thêm:

Trộn đều, ủ 10 phút, rửa, thêm dung dịch nền và đo giá trị phát quang.

Chu kỳ hiệu chuẩn là 28 ngày. Hiệu chuẩn được yêu cầu trong các trường hợp sau:

• Khi sử dụng lô Bộ xét nghiệm mới
• Khi kết quả của mẫu kiểm soát chất lượng nằm ngoài phạm vi quy định

【Quy trình kiểm soát chất lượng】

Mỗi phòng xét nghiệm cần thiết lập hệ thống kiểm soát chất lượng và các quy tắc kiểm soát chất lượng riêng theo các yêu cầu liên quan. Khuyến nghị sử dụng sản phẩm kiểm soát chất lượng để thực hiện QC theo GB/T 20468-2006 – Hướng dẫn kiểm soát chất lượng nội bộ đối với các phép đo định lượng trong phòng xét nghiệm lâm sàng. Giá trị đo của mẫu QC phải nằm trong phạm vi quy định trước khi tiến hành xét nghiệm mẫu bệnh phẩm. Nếu vượt quá phạm vi quy định, cần áp dụng các biện pháp khắc phục thích hợp hoặc liên hệ với nhà sản xuất.

【Tính toán kết quả】

Thiết bị sẽ tự động tính toán nồng độ T3 dựa trên đường chuẩn và giá trị RLU đo được.

• Đơn vị nồng độ: ng/mL hoặc nmol/L
• Quy đổi đơn vị:
  • ng/mL × 1,536 = nmol/L
  • nmol/L × 0,651 = ng/mL

【Khoảng tham chiếu】

Quần thể khỏe mạnh: 0,78 – 2,05 ng/mL

Khoảng tham chiếu này được thiết lập dựa trên CLSI C28-A3, kết quả xét nghiệm của không dưới 120 mẫu lâm sàng và các tài liệu tham khảo liên quan. Do sự khác biệt về địa lý, chủng tộc, giới tính và độ tuổi, mỗi phòng xét nghiệm nên thiết lập khoảng tham chiếu riêng hoặc thực hiện xác minh chuyển đổi khoảng tham chiếu.

【Diễn giải kết quả】

1. Kết quả xét nghiệm của Bộ xét nghiệm này chỉ được sử dụng như một phần trong đánh giá lâm sàng tổng thể của bệnh nhân. Chẩn đoán lâm sàng cần được xác định kết hợp với triệu chứng lâm sàng và các phương pháp chẩn đoán khác.
2. Nếu nồng độ mẫu thấp hơn giới hạn trắng, kết quả sẽ được báo cáo là <0,20 ng/mL; nếu vượt quá phạm vi đo, kết quả sẽ được báo cáo là >10,00 ng/mL.